高质量的内切酶 和 普通内切酶的差别
不好的内切酶常常被各种蛋白酶、非特异外切酶和核酸外切酶污染。使用被外切酶污染的内切酶切割DNA，则会在切割底物的同时破坏产物的末端（外切酶偷偷切掉1、2个bp，琼脂糖电泳却看不出来），让后续的连接、克隆和表达出现问题！
    而NEB提供的内切酶大部分都经过重组改造，在最大程度上避免了外切酶污染的问题，让你的基因安全可靠！

好的内切酶

不好的内切酶

· 活性高
 · 品质稳定，保存期长
 · 无其它核酸酶污染（包括外切酶污染）

·活性不高
 ·保存一段时间后活性迅速下降
 ·有其它核酸酶的污染（包括外切酶污染）


质粒DNA

　酶切反应　

 

好的内切酶切割

　　　不好的内切酶切割

 　

 

完整的DNA片段



 　　　　　　

连接

　　　完整的DNA片段

 

　　　　　　　　　　　少量的外切酶损坏DNA末端
 　　

　　　　　　　　　　　不完整的DNA片段+1、2个dNTP

　　　　　　

连接

 

 

 

 

成功连接，克隆并表达

连接失败，克隆不成功，无法表达或产物不正确

NEB EcoRV: Survivalrate=49/50

Company T EcoRV: Survivalrate=3/50

 


 看看，不同质量的内切酶，实验结果大不相同！

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